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牛血清在培养的过程中出现“小黑点”的现象该怎么防止呢?

发布时间:2020-10-12   点击次数:513次
   牛血清是细胞培养中用量大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,具有极为重要的功能。牛血清在培养基中扮演着这么多的角色,那么它在培养的过程中也会出现一些的问题,比如说:在培养过程中会出现一个个“小黑点”的现象,这是怎么一回事呢?
  我们一旦发现培养基中有黑点,我们先不要着急,也不要惊慌,要搞清楚这个黑点是什么?什么形成的?
  首先,要肉眼观察培养基是否混浊,然后,在镜下观察培养细胞生长的状态,黑点是否游动等。如果细胞被污染,微生物则会大量繁殖,培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。如果在镜下观察细胞,生长状态良好,与黑点出现前相比,没有任何变化,那么,黑点的出现可能与以下几种情况有关:
  首先可能是细胞生长过老,破碎的细胞残骸;再有可能就是血清质量不好,反复冻融的结果;然后可能是配制培养基的pH值偏高,不宜细胞生长;其次可能是亦有可能是配制培养基的水质、容器不合格(可应用离心、过滤的方法去除这些黑点);后可能是培养的原代细胞中出现小黑点(可能是原代组织中的杂质,多次传代可以消除)。
  那么我们如何防止黑点生成呢?通过我们多年的从业经验,凯学生物科技认为至少要做到以下几点:
  (1)尽可能地减少血清冻融次数;
  (2)培养基无需37℃水浴;
  (3)培养基保持*PH值7.0- 7.2;
  (4)严格控制配制培养基的水质,容器定期刷洗;
  (5)掌握细胞传代的zui时机,细胞切勿生长过老。
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