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点击次数:1411 发布时间:2013-05-27

目的建立风疹病毒RNA TaqMan实时荧光定量RT-PCR方法,制备风疹病毒RT-PCR扩增子作为该方法的参考标准品。方法设计引物与探针,优化PCR条件,建立风疹病毒RNA实时荧光定量RT-PCR方法,并制备风疹RT-PCR扩增子作为该方法的参考标准品。结果制备的风疹特异性扩增子参考标准品为503 bp的片断,原液浓度为2.75×109copies/μl,纯度为92%;采用该特异性扩增子参考标准品建立的标准曲线相关系数r为-0.9993(r2=0.9986),P<0.001。结论本研究建立的风疹特异性扩增子参考标准品稳定性好,纯度高;特异性扩增子参考标准品浓度的对数值与Ct值之间具有良好的线性关系,证实了本研究建立的风疹RNATaqMan实时荧光定量RT-PCR方法定量的准确性。因而,建立的风疹RNA实时荧光定量RT-PCR方法简便快捷、定量准确,可用于临床标本中风疹RNA的定量检测。 
 

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