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ELISA试剂盒实验中常见问题和解决方法

发布时间:2020-08-18   点击次数:529次
   elisa试剂盒回收率是反应待测物在样品分析过程中的损失的程度,损失越少,回收率越高,如果作标液1PPM,就是1毫克/升,而作出标准数据为0.99毫克/升,就是说你的回收率是99%,这个与真实成分有密切的关系,说明方法的准确度。比如水中总无机氯含量测定,样品水中含有无机氯20mg/L,取100mL被测水样品,加入0.1mL浓度为10mg/mL的含无机氯标准样品,测定时忽略体积变化,如果测定出样品中无机氯为2.98mg/L,则认为回收率为99%。
  接下来小编为您一起了解下ELISA试剂盒实验中常见原因如下:
  a)可能原因:加样本及试剂量不准;孔间不一致;
  解决方法:校正移液器,吸嘴要配套,装吸嘴时要紧密。
  重复某一样品时,加样时间尽可能与在次接近;
  重复测定标本,操作条件、人员等应尽可能与上次保持一致,以排除这些因素造成的不一致的可能性;样品稀释前应充分混匀。
  b)可能原因:加样过快,孔间发生污染;
  解决方法:重复测定标本,操作条件、人员等应尽可能与上次保持一致,以排除这些因素造成的不一致的可能性;加样不要过快。
  c)可能原因:加错样本;
  解决方法:检查记录和试剂,是否加错样本。
  d)可能原因:加样本及试剂时,加在孔壁上部非包被区;
  解决方法:加样枪头不要贴壁。
  e)可能原因:不同批号试剂盒中组分混用;
  解决方法:不同批号试剂盒中组分不可混用。
  f)可能原因:温育时间、洗板、显色时间不一致;
  解决方法:检查时间是否一致。
  g)可能原因:孔内污染杂物;
  解决方法:离心样品,排除杂物。
  h)可能原因:试剂/样品没有混匀;
  解决方法:充分混匀样品和试剂。
  i)可能原因:血清标本未完全凝固即加入,反应孔内出现纤维蛋白凝固或残留血细胞,易出现假阳性反应等。
  解决方法:待血清标本完全凝固后做试验。
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