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人Elisa试剂盒有效储存法
点击次数:691 发布时间:2014-12-11
   人Elisa试剂盒主要的客户是医学院校,做实行面向的种属重要是人,大鼠和小鼠,如今市面市情上鸡、牛、马、羊、兔种种指标的盒子都有售,真不知道这些抗体是怎么来的。据我所相识,这些炎症指标依然有很大种属特异性的。对付一些小分子的检测,例如:前线腺素、糖皮质激素的检测,我的理解是要用竞争法ELISA去检测,也要购买采用这个方法的盒试剂盒。ELISA试剂盒一般细胞因子的检测,都是采用常规的夹心法ELISA检测,由于因子分子量比力大,一般10几个KD左右,很容易找到两个或多个抗原表位。
  已包被抗原或抗体的固相载体在低温(2~8℃)干燥的条件下一般可保存6个月以上。有些不完整的试盒,人Elisa试剂盒仅供应包被用抗原或抗体,检测人员需自行包被。结合物即酶标记的抗体(或抗原),是ELISA中zui关键的试剂。良好的结合物应该是既保有酶的催化活性,也保持了抗体(或抗原)的免疫活性。结合物中酶与抗体(或抗原)之间有恰当的分子比例,在结合试剂中应尽量不含有或少含有游离的(未结合的)酶或游离的抗体(或抗原)。此外,结合物尚要有良好的稳定性。
  人Elisa试剂盒的主要作用是提供基本营养物质、提供激素和各种生长因子、提供结合蛋白、提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞起到某些保护作用。Elisa试剂盒也就是指血液凝固后,在血浆中除去纤维蛋白分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白已被除去的血浆。下面来说保存Elisa试剂盒的条件与注意事项。
  1、需要长期保存的人Elisa试剂盒必须储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中.4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月.由于Elisa试剂盒结冰时体积会增加约10%,因此,Elisa试剂盒在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。
  2、热灭活是指56℃, 30分钟加热已完全解冻的人Elisa试剂盒.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使Elisa试剂盒中的补体成分(complement)灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成Elisa试剂盒沉淀物显著增多,而且还会影响Elisa试剂盒的质量.补体参与反应有:细胞毒作用, 平滑肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板释放组胺, 增强吞噬作用, 促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。
  3、瓶装人Elisa试剂盒解冻需采用逐步解冻法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的Elisa试剂盒放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将人Elisa试剂盒从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀;而小分子很难找到两个不通的表位,也就决定了包被抗体和检测抗体无法同时结合小分子并固相化。解决方案便是酶标板上包被二抗,每个孔加入一定量的酶标的小分子,然后加样品,再加不带标志的检测抗体,显色底物。样品的目标小分子的含量越高,吸光度越低。
  人Elisa试剂盒页面出来大量的商品化的试剂盒,千篇一律的明书时候,我真的是蒙了,我怀疑自己跟不上时代了。我不去评论这些试剂盒的真假,我仍旧建议做这些检测指标的朋友,ELISA检测方法简单,灵敏度高,我个人认为ELISA检测人Elisa试剂盒或者培养上清的细胞因子、胰岛素、激素等排泄型的小分子卵白的定量检测;ELISA试剂盒病原体抗原的定性与定量;评估自己制备的人Elisa试剂盒抗体的效价等。很多客户有个误区,拿来一个指标就想当然地尝试用ELISA去检测,我还是建议多动脑,该检测活性的检测活性,

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