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人Elisa试剂盒与温度的关系要弄清
点击次数:613 发布时间:2015-03-03
   人Elisa试剂盒继50年代的免疫荧光(IFA)和60年代的放射免疫(RIA)分析技术之后,在70年代初期又建立了用酶来标记抗原或抗体的分析技术。由于酶的生物催化作用,一个酶分子在数分钟内可以催化几十几百个底物分子发生反应,产生了放大作用,人Elisa试剂盒使得原来极其微乎其微的抗原或抗体在数分钟后就可被识别出来,这种技术被称为酶联免疫吸附试验法(Enzyme—Linked Immunosorbent Assay,ELISA),本法自70年代初期由VAN WEEMEN、SCHUARS.ENGVALL及PERLMARN等相继分别报道后,现已引起广泛重视。人Elisa试剂盒是免疫诊断中的一项新技术,现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定,根据已经使用的结果,认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查,而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此,也适合于血清流行病学调查。人Elisa试剂盒本法不仅可以用来测定抗体,而且也可用于测定体液中的循环抗原,所以也是一种早期诊断的良好方法。
  因此人Elisa试剂盒在生物医学各领域的应用范围日益扩大,可概括四个方面:
  1.免疫酶染色各种细胞内成份的定位。
  2.研究抗酶抗体的合成。
  3.显现微量的免疫沉淀反应。
  4.定量检测体液中抗原或抗体成份。
  人Elisa试剂盒湿盒应先放在保温箱中预温至划定的温度,特别是在气温较低的时候更应如斯。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间,这一保温过程称为温育,有人称之为孵育,在人Elisa试剂盒中似不恰当。这就是为什么ELISA反应老是需要一定时间的温育。为加速反应,可进步反应的温度,有些试验在43℃进行,但不宜采用更高的温度。人Elisa试剂盒属固相免疫测定,抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。
  酶联免疫吸附试验法以其灵敏度高(可达 ng 甚至pg 水平),特异性好等优点,在生命科学各领域得到广泛应用,人Elisa试剂盒已迈出医药、临床领域,步入农业、渔业、畜牧业和食品加工业。低浓度的酶标抗体极容易受到高温、微生物、以及蛋白酶的影响而失活,严重影响产品的货架期,过去通常将酶标抗体冻干保存,然而这样的保存,不仅由于在冻干的过程中会影响酶标抗体的活性,人Elisa试剂盒而且在临床应用中颇为不便。适当的缓冲液以及添加无关蛋白质、糖、防腐剂以及一些含氨基的化合物等都会对对酶标抗体的活性起一定的保护作用,因此我们设计了一组保护剂用于保护酶标抗体,与未添加任何糖蛋白的酶标抗体做对照,将经保护的人Elisa试剂盒酶标抗体及未保护的酶标抗体置于37℃烘箱中放置6天,考察保护液对酶标抗体的影响。

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