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分枝杆菌的细胞壁内含有大量脂质包围在肽聚糖的外面, 所以分枝杆菌一般不易着色,传统的染色方法要经过加热和延长染色时间来促使其着色。分枝杆菌中的分枝菌酸与染料一旦结合后,就很难被酸性脱色液脱色,故名抗酸染色,其中代表性是结核杆菌Ziehl-Neelsen染色法,该法是WHO推荐热染的方法。
Leagene(金胺O荧光法)属于荧光染色液,无需加热,相对较抗酸热染液安全,其染色原理是在室温条件下Auramine O染色以及复染后,用含有紫外光源的荧光显微镜检查,抗酸杆菌呈亮黄色,而其他细菌及背景中的物质呈暗黄色,这种方法可用低倍镜检,因此能更快速找出抗酸性菌。该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。