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大鼠Elisa试剂盒使用双单抗
点击次数:573 发布时间:2014-12-26
     大鼠Elisa试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪生长激素(GH)水平。用纯化的猪生长激素(GH)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入生长激素(GH),再与HRP标记的生长激素(GH)抗体结合,大鼠Elisa试剂盒形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的生长激素(GH)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中猪生长激素(GH)浓度。
    大鼠Elisa试剂盒提供原倍标准品一支,分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,大鼠Elisa试剂盒然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。用封板膜封板后置37℃温育30分钟。将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。猪ELISA试剂盒小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
    现在市场上的大鼠Elisa试剂盒质量参差不齐,各类生物公司扎堆,如何去挑选适合自己的试剂盒就显得特别重要,具体我们总结有以下几点可供参考:
    一、特异性,大鼠Elisa试剂盒的特异性与试剂盒的关键组分,抗体对有关,若抗体对中之一为多抗,另一个必须为单抗,建议使用双单抗。
    二、灵敏度,灵敏度反映的是试剂盒检出被检物质的zui低量的能力,用户可根据自己样本中待检指标的量选择合适的试剂盒,如果待检指标量很低,一般的试剂盒不能满足要求,可选择高敏的大鼠Elisa试剂盒。
    三、重复性,科学实验讲求重复性,一般大鼠Elisa试剂盒,其板内和板间变异系数应该控制在15%以内。
    四、简便性,试剂盒在保证高质量数据的情况下,实验时间越短,操作越便利,越容易受到用户欢迎!这也不妨作为选择试剂盒的一个指标。
    五、经济性,进口分装试剂盒因为省去不少物流和报关费用,与国外原装进口试剂相比价格上有比较大的优惠,大鼠Elisa试剂盒而且能提供比较灵活的包装规格,特别是48T等小包装,目前很多客户因为对品牌的信任度问题,主要还是选择国外原装进口,但是国内进口分装比较成熟的公司仍然是一个非常好的选择!
    大鼠Elisa试剂盒订单下了,收到货到运用这段时间,也是要好好保存的,要特别注意避免出现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团,其有类似过氧化物的活性,因此,大鼠Elisa试剂盒在以HRP为标记酶的ELISA测定中,如血清标本中血红蛋白浓度较高,则其就很容易在温育过程中吸附于固相,从而与后面加入的HRP底物反应显色,样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染,大鼠Elisa试剂盒一则细菌的生长,其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用;二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰,血清标本如是以无菌操作分离,则可以在2~8℃下保存一周,大鼠Elisa试剂盒如为有菌操作,则建议冰冻保存。样本的长时间保存,应在-70℃以下,冰冻保存的血清标本须注意避免因停电等造成的反复冻融。标本的反复冻融所产生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子产生破坏作用,从而引起假阴性结果。此外,冻融标本的混匀亦应注意,不要进行剧烈振荡,反复颠倒混匀即可,大鼠Elisa试剂盒在保存中如出现细菌污染所致的混浊或絮状物时,应离心沉淀后取上清检测。

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